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      科学家成功研发新一代光遗传学工具

      作者:玻璃鳞片胶泥     发布日期: 2021-10-11     二维码分享

      近日,华东师范大学生命科学学院研究员叶海峰团队研发了一种??樾?、灵敏度高、可逆性良好的新一代光遗传学工具,为基础医学和转化医学研究,尤其是精准可控的基因治疗和细胞治疗提供了强有力的新型控制系统。相关研究成果近日在线发表于《自然—生物技术》。

      利用一束光治疗疾病不再是神话故事和科幻小说中才会出现的情节,光遗传学的出现,让这个不可思议的治疗手段成为可能。近年来,科学家通过对光敏蛋白的挖掘和设计,构建了一系列光遗传学工具,并将其应用于肿瘤及代谢疾病等治疗领域。虽然光遗传学工具蓬勃发展,但是要真正实现利用一束光治疗疾病仍然需要克服许多困难。

      叶海峰课题组将目光放在了拟南芥的光敏蛋白PhyA上,在红光照射下,该蛋白能和其伴侣蛋白FHY1形成二聚体,并在远红光照射下解离。根据这一特点,研究人员构建了基于PhyA-FHY1的转录激活系统。研究人员将PhyA与GAL4的DNA结合域融合表达,将FHY1和转录激活因子VP64融合表达。红光刺激下,PhyA-GAL4和FHY1-VP64结合形成复合体并招募RNA聚合酶,从而启动下游基因的表达。

      起初,使用完整的PhyA并不能激活下游基因的表达。为此,研究人员对其进行了工程改造,构建了截短版本的ΔPhyA,并通过激活子和伴侣蛋白的优化,.终得到了一个??樾∏腋叨攘槊粝煊旃獾墓庖糯Чぞ?,并将其命名为REDMAP。

      研究人员将ΔPhyA定位到细胞膜上,将FHY1和SOS蛋白的激活域SOScat进行融合表达,通过红光照射来控制SOScat的细胞定位,从而实现了Ras/MAPK信号通路的激活和去激活,成功构建了REDMAPSOS-Ras工具。此外,研究人员还构建了REDMAPCas工具,将REDMAP系统与基因编辑工具CRISPR-dCas9结合在一起,实现了对哺乳动物细胞、小鼠肝脏及肌肉内源基因转录的高效调控。

      同时,研究人员探究了REDMAP系统在基因治疗领域的能力。由于截短的ΔPhyA蛋白具有较小的尺寸,可以利用腺相关病毒包装。因此,研究人员将REDMAP包装至腺相关病毒中并将其注射至小鼠体内,实现了长达3个月以上的光控基因表达。

      治疗蛋白的精准控制对疾病的治疗具有重要意义。研究人员将装载REDMAP系统的工程化细胞移植至小鼠、大鼠和兔的皮下,探究其光响应能力。结果显示,短时间的光照(1~5分钟)即可诱导报告基因的高效表达。同时,研究人员还通过光来精准控制小鼠和大鼠体内胰岛素的表达,成功实现了对糖尿病小鼠和大鼠血糖稳态的控制。无需每天定时服用药物或注射胰岛素,只需要每天光照几分钟即可达到显著降血糖的效果,这充分表明REDMAP系统在精准可控的细胞治疗领域具有极高的应用潜能。(黄辛)

      (——文章转自光明网,如有侵权请联系玻璃鳞片胶泥批发的小编删除)

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